لحساب اختلاف اللون والانحراف الكروي ، هناك نوعان من اختلاف اللون: محوري (طولي) وأفقي (جانبي). عند تركيز الضوء ذي الأطوال الموجية المختلفة على مسافات متعددة من العدسة (إزاحة التركيز البؤري) ، يحدث انحراف محوري. في الأطوال البؤرية الطويلة ، تعتبر الانحرافات الطولية نموذجية. عندما يتم تركيز أطوال موجية متعددة على مواضع متعددة على المستوى البؤري ، تحدث الانحرافات الجانبية لأن تكبير و / أو تشويه العدسة سيختلف أيضًا باختلاف الأطوال الموجية. الطول البؤري الجانبي هو نموذجي عند الأطوال البؤرية القصيرة. أحيانًا ما يستخدم الاختصار الغامض LCA للكروماتوجرافيا الطولية أو العرضية.
الانحراف اللوني والانحراف الكروي من
بالمحتوى التالي ، تكون إجابات الأسئلة السابقة المتعلقة باختلاف اللون كما يلي.
إجابة/
تغير اللون في الإضاءة. (أ) تعليمات إعداد CLSM فقط لقياس طيف ألوان الإضاءة. عندما يتم فتح الفتحة بأقصى حجم لها ، يدخل كل الضوء تقريبًا لـ PMT. لذلك ، فإن التحويل اللوني للضوء المنبعث لا يكاد يذكر ، ويتم قياس ضوء الإضاءة فقط. (ب) تلطيخ الخلايا الثابتة باستخدام Alexa 488 و phalloidin جنبًا لـ جنب مع 594 ، ومحاذاة القناة الخضراء التي تم الحصول عليها بإثارة 488 نانومتر مع القناة الحمراء التي تم الحصول عليها عبر إثارة 488 (“شريط أزرق” 488) أو 561 (” 488 + 561 “شريط أخضر) نانومتر. يتم عرض مجموع المتجه لسبع معلمات محاذاة عامة. تستخدم زيوت الغوص المختلفة للتحقق من آثار الانحراف والتشتت الكروي. (C) رسم تخطيطي لإضاءة WFM و 3D-SIM حول العينة. (د) باستخدام نفس العدسة الموضوعية ، استخدم WFM أو 3D-SIM لأخذ نفس العينة من (ب). يتم تحلل صورة WFM (WFM Decon) ، ويتم حساب متوسط صورة 3D-SIM الأولية لإنشاء صورة WFM زائفة. فيما يتعلق بالقناة الحمراء المثارة عند 561 نانومتر والقناة الخضراء متحمسة عند 488 نانومتر ، فإن القناة الحمراء المتحمسة تتماشى مع 488 نانومتر والقناة الخضراء المتحمسة محاذاة مع 488 نانومتر. يظهر مجموع متجه لمعلمات المحاذاة السبعة.